Sexado molecular de aves

22 junio, 2012

La ausencia de dimorfismo sexual en la mayoría de las aves, sobre todo las exóticas, o su manifestación sólo en estadío adulto, hace necesario algún método alternativo para determinar el sexo de las mismas. A veces no es necesario, puesto que sólo tenemos dichas aves como animales de compañía. Para los criadores sin embargo, conocer el sexo de sus animales lo antes posible es una condición imprescindible para el buen andar del negocio y la cría de nuevos pichones.

Tradicionalmente se ha determinado el sexo mediante endoscopia, ya que los órganos sexuales en las aves son internos. Esta técnica, aunque muy fiable, es también muy invasiva con nuestras aves, por lo que muchos criadores la rechazan. Además, es muy difícil de realizar sobre pequeños ejemplares.

El ADN al rescate

Actualmente existe un método extremadamente fiable y rápido, y que además no entraña ningún tipo de riesgo para el animal. Se trata del sexado molecular de aves. El sexo de todo ser vivo, además de toda la información que lo convierte en tal, se halla codificado en su ADN. En las aves, el sexo femenino viene dado por una pareja de cromosomas ZW, y el masculino por una pareja de cromosomas ZZ. Analizando un gen específico del cromosoma W, el gen chd, podemos determinar el sexo de nuestras aves.

Mediante la técnica de la PCR (Polymerase Chain Reaction), obtenemos muchas copias de una región del gen chd. Esta región tiene una longitud de unas 400pares de bases (pb). En esa misma reacción también obtenemos muchas copias de una región muy parecida que se halla en otro gen específico del cromosoma Z, y que tiene una longitud de 600pb. Es decir, si analizamos el ADN de una hembra obtendremos dos grupos de moléculas, uno de 400pb y otro de 600pb. En el caso de los machos, sólo habrá un grupo de moléculas, el de 600pb.

Así, cuando separamos esos dos grupos de moléculas usando la técnica de la electroforesis, obtenemos un patrón similar al que aparece en la foto. Como se puede observar, son claramente distinguibles los dos grupos de moléculas y por regla general, las muestras que presentan dos bandas corresponden a hembras, y las que sólo presentan una banda corresponden a machos.

642-658 son muestras de aves. C+ son los controles positivos de hembra y macho, y la muestra central es una “regla” que se usa para medir la longitud de las moléculas que se analizan.

¿Cómo funciona?

El resultado final es muy bonito, pero para llegar hasta ahí hay que dar varios pasos previos, el primero de los cuales (y uno de los más importantes) ocurre en su aviario, cuando usted toma las muestras de sus aves.

Toma de muestras: Lo que Newbiotechnic necesita para extraer ADN analizable son células, que se encuentran en las plumas o en la sangre. La muestra con la que mejor trabajamos es la sangre, y sólo necesitamos un par de gotas. Con una aguja hipodérmica, dé un pinchazo en la vena del ala y deje caer un par de gotas sobre un papel normal. Deje secar y listo. Si prefiere enviarnos plumas, las mejores son plumas en crecimiento, con un cañón gordo a ser posible irrigado y con muchas células epiteliales. De ahí es de donde extraemos el ADN.

Es importante que cambie de aguja o la esterilice para cada ave, y que use guantes o se lave las manos entre la toma de plumas de un ave y otro. Así evitaremos contaminaciones y ayudaremos a que el proceso sea aún más fiable.

También es muy importante que al pegar las plumas en la solicitud, la cinta adhesiva no toque el cañón de la pluma, ya que éste se contamina muy fácilmente.

La mejor zona para extraer la plumas en crecimiento es la zona de la cloaca. Es importante el uso de guantes desechables para el proceso.

Deposición de la muestra: Realizamos el análisis en placas de 96 pocillos, así que cuando reunimos 91 muestras (más 5 controles), nuestra técnico corta un pequeño trozo de cada cañón o recorta un poquito de papel con sangre y lo deposita en un pequeño pocillo de la placa. Este proceso es laborioso y debe ser realizado concienzudamente. Por ejemplo, si introducimos la muestra correspondiente al pocillo A6 en el pocillo A7 y a partir de ahí las desplazamos todas un pocillo, todos los resultados que demos corresponderán a otra muestra.

Extracción de ADN: Sometemos las muestras a choques térmicos con un reactivo para romper las paredes celulares y extraer el ADN de su interior.

Realización de la PCR. La PCR es conocida familiarmente como la “fotocopiadora de ADN”. Mediante esta técnica conseguimos muchas copias de una región específica del ADN, en este caso un trozo del gen chd del cromosoma W y una región muy parecida del cromosoma Z. Estos dos tipos de copias sólo aparecerán si el ADN original era el de una hembra. Si era el de un macho, sólo conseguiremos muchas copias de la región del cromosoma Z.

Electroforesis. El ADN está cargado negativamente, así que si lo depositamos en una matriz y aplicamos corriente, las moléculas se desplazarán hacia el polo positivo. Las moléculas más pequeñas (las del cromosoma W) “correrán” más rápido y las más grandes (las del cromosoma Z) lo harán más despacio. Por eso veremos una diferencia entre ambas y podremos distinguir si el ADN original era de un macho o de una hembra.

NBT, un equipo de profesionales a su servicio

Newbiotechnic (NBT) ha sido la empresa pionera en España en ofrecer el servicio de sexado molecular de aves y somos líderes en este mercado. Hemos realizado alrededor de 13000 sexados en casi dos años, y actualmente venimos realizando unos 900 análisis al mes. Tenemos un equipo de profesionales (5 Doctores en Biología, 2 Licenciados y 2 técnicos superiores de laboratorio) a su disposición para atender cualquier duda o sugerencia que tenga, y para asegurar la mayor calidad en el tratamiento de las muestras y los resultados. Ofrecemos una atención personalizada a cada caso, y gracias al constructivismo de nuestros clientes y a un gran esfuerzo humano e investigador, somos capaces de ofrecer el sexado de más de 300 especies de aves.

En nuestra página web www.sexadodeaves.com encontrarás toda la información necesaria para sexar a tus aves así como las últimas noticias del laboratorio, vídeos explicativos y mucho más. Además, puedes seguirnos en Facebook: www.facebook.com/newbiotechnic, y en Twitter: @sexadodeaves

*Excepto aves del género Tauraco que precisan de un análisis adicional y cuyo precio de sexado es distinto.

Elena Quesada Hernández
Dra. en Ciencias Biológicas

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Comments (2)

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  1. Antonnnnio dice:

    Cuando van ha hacer analiticas de enfermedades?????

  2. Antonio dice:

    Hola,
    Estamos trabajando en volcar toda la información en la página, pero sí que hacemos analíticas de PBFD, psitacosis, poliomavirus y enfermedad de Pacheco.
    Si quieres, puedes solicitar el formulario a través de sexadodeaves@nbt.es Pronto tendremos toda esa documentación en nuestra web. Gracias por tu interés